Непрямая проба кумбса что
Непрямая проба кумбса что
Принцип антиглобулинового теста Кумбса. Антиэритроцитные антитела неполного типа и молекулы комплемента (С), находящиеся на поверхности эритроцитов выявимы — прямой тест — их агглютинацией в контакте с животной сывороткой, содержащей антитела на человеческий антиглобулин (антиглобулиновая сыворотка). Свободные в сыворотке неполные антитела выявляются — косвенный тест — их закреплением на смеси нормальных эритроцитов группы 0, все антигены которых принадлежат известной резус-системе, далее агглютинируемые под воздействием антиглобулиновой сыворотки.
Материалы, реагенты антиглобулинового теста Кумбса: пробирки на 10/100 мл; градуированные пипетки на 1, 2 мл; пастеровские пипетки; штативы; предметные нешлифованные стекла; 8,5‰ раствор NaCl; эритроциты. Эритроциты больного, равно как и принадлежащие к группе 0 получим из свежеотобранной крови на противосвертывающем веществе (раствор ЭДТА).
Эритроциты группы 0 отобрать с таким расчетом, чтобы они исходили от лиц в норме и содержали все антигены резус-системы. Их можно сохранять до 7 дней в аутологической плазме, при температуре + 4°С. В случае отсутствия эритроцитов группы 0, известной антигенной мозаики, можно использовать смесь эритроцитов группы 0, резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов.
Сыворотка больного должна быть свежеотобранной.
Техника антиглобулинового теста Кумбса:
а) Прямой тест Кумбса: эритроциты больного промыть 3 раза 8,5‰ раствором NaCl.
На несколько предметных стекол нанести по крупной капле из разведений антиглобулиновой сыворотки, а рядом — по маленькой капле из осадка эритроцитов больного; перемешать капли углом стекла. Приготовленный материал оставить на столе 5 мин., затем исследовать на наличие агглютинатов. В случае положительного результата определить максимальный агглютинирующий титр.
б) Косвенный тест Кумбса: эритроциты группы 0, резусположительные и резус-отрицательные промыть 3 раза 8,5‰ раствором NaCl и подвергнуть воздействию сыворотки больного из расчета 2 капли эритроцитов на 8—10 капель сыворотки, затем, в течение 60 мин., провести инкубацию при температуре 37°С. После этого снова трижды промыть эритроциты и воздействовать на них антиглобулиновой сывороткой, по указаниям для прямого теста Кумбса.
Когда речь идет о холодовых активных антителах сенсибилизацию эритроцитов группы 0 провести 60 мин. при температуре + 4°С.
Примечание: 1) Не проводить прямой тест Кумбса на эритроцитах, сохраненных один или несколько дней при температуре + 4°С или комнатной температуре, поскольку результаты могут оказаться ложноположительными за счет фиксации имеющихся в нормальной сыворотке непол ных, активных на холоде антител. 2) В случаях выраженной гиперпротеинемии промывать эритроциты 4—5 раз и проверить отсутствие сывороточных белков в последней промывной жидкости, с помощью сулфосалициловой кислоты.
Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021
Титр антител к эритроцитарным антигенам (непрямая проба Кумбса)
Где проводится: Во всех медицинских центрах и лабораториях «Тонус»
Срок выполнения: 3 рабочих дня
+ Забор материала 250 руб.
+ Забор анализа на дому у взрослого (только Нижний Новгород) 200 руб.
Непрямая проба Кумбса (определение титра антител к эритроцитарным антигенам) — метод диагностики природы гемолитических анемий, определения возможности переливания крови конкретному пациенту, а также, как один и анализов при ведении беременности.
Непрямая проба Кумбса представляет собой реакцию агглютинации, которая позволяет выявить антиэритроцитарные антитела в сыворотке крови, не связанных с эритроцитами.
Проба является «непрямой», так как для проведения анализа сначала необходимо фиксировать на эритроцитах здорового человека (используется донорская кровь группы I (0)). При инкубации сыворотки крови пациента с донорской кровью, антитела, находящиеся в сыворотке, будут связываться с эритроцитами донора. Это первый этап непрямой пробы Кумбса.
Второй этап по сути является прямой пробой Кумбса – то есть обработка эритроцитов (на которых сорбировались антитела) антиглобулиновой сывороткой. Данная сыворотка содержит антигены против антител, сорбированных на эритроците.
При появлении агглютинации пробу считают положительной. Подтверждение наличия антиэритроцитарных антител позволяет врачу выбрать правильное направление диагностического поиска, а также, при использовании специфических проб определить природу антител.
Специальной подготовки к исследованию не требуется
Положительный результат соответствует наличию в сыворотке крови пациента антиэритроцитарных антител. При проведении гемотрансфузии такой анализ указывает на несовместимость донорской крови и крови паицента.
При дифференциальной диагностике гемолитически анемий, положительная непрямая проба Кумбса говорит о наличии иммунного генеза анемии.
У беременный положительная непрямая проба Кумбса может быть признаком риска развития гемолитической болезни новорожденного, что требует начала профилактических мероприятий.
Проба Кумбса
Количество пациентов разного возраста с заболеваниями крови увеличивается с каждым годом. Проба Кумбса – клиническое исследование крови на выявление в организме человека антител, представляющих угрозу для здоровья. Является важным диагностическим методом в акушерстве, реаниматологии, хирургии, гематологии.
Показания к проведению
Планирование беременности и подготовка к родам. Позволяет выявить присутствие антител к резус-фактору в крови женщин во время беременности.
Необходимость переливания крови. Тест выявляет для какого типа крови пациент может стать донором.
Плановое хирургическое вмешательство. Если произойдет кровопотеря, врач заранее будет знать группу и резус-фактор пациента.
Диагностика гемолитических заболеваний.
Типы проб
Выделяется 2 разновидности:
Прямая – позволяет обнаружить антитела на поверхности эритроцитов. Это необходимо для диагностики уже имеющихся гемолитических патологий. Иногда к проведению теста Кумбса прибегают в том случае, когда необходимо выявить причины развития таких патологий, как анемия и желтуха.
Непрямая проба Кумбса – помогает выявить антитела в плазме крови, что необходимо для оценки совместимости при переливании и диагностики рисков резус-конфликта во время беременности.
Подготовка к процедуре и проведение
Особой подготовки для взятия крови на анализ не требуется. Чтобы результаты анализы не были искажены, нужно приостановить на время прием лекарственных препаратов. Ограничений в еде или режиме питания нет.
за 3 суток откажитесь от алкоголя
последний прием пищи должен быть за 8 часов до взятия крови на анализ
за 1 час откажитесь от курения, физических, умственных и эмоциональных нагрузок
перед процедурой выпейте стакан чистой негазированной воды
При проведении прямой пробы Кумбса из вены с помощью шприца берется кровь. Перед началом проведения процедуры выполняется тщательная дезинфекция места прокола, а после забора материала для исследования налаживается вата либо стерильная марля. В том случае, если анализ проводится у новорожденных, то кровь берется из пуповины.
После проведения процедуры можно продолжить прием лекарственных средств в обычном режиме.
Результаты исследования
Положительная реакция Кумбса говорит о факте резус-сенсибилизации организма, что является главной причиной резус-конфликта в случае переливания крови или при вынашивании ребенка с иным резус-статусом.
Отрицательная непрямая проба говорит о совместимости крови донора с кровью реципиента (или крови матери и ребенка) по резус-фактору. Отрицательная прямая проба свидетельствует о том, что специфические антитела к резус-фактору, связанные с эритроцитами, в крови отсутствуют и не могут являться причиной гемолиза.
Как быстро известен результат пробы?
Обращаясь в частный медицинский центр «Медюнион», вы можете сдать анализ в наиболее удобном для вас месте: прямо в клинике или на дому.
Анализ на пробу Кумбса выполняется в течение 1 дня и в стандартном режиме будет готов через сутки после взятия крови. Все данные автоматически высылают на электронную почту пациента, указанную при регистрации в клинике.
Проба Кумбса
Прайс на услуги
На сегодняшний день существует два вида этого лабораторного анализа: прямая и непрямая проба.
С помощью прямой пробы Кумбса выявляют антитела, связанные с эритроцитами, для диагностики гемолитических заболеваний и выявления причин анемии. Непрямая проба позволяет найти антитела, которые не связаны с эритроцитами, чтобы оценить возможность возникновения опасных ситуаций при переливании крови. Кроме того, непрямой тест является обязательной частью обследования беременных женщин на ранних сроках для исключения риска резус-конфликта матери и плода.
Исследование может назначаться терапевтом, гематологом, инфекционистом, акушером-гинекологом, педиатром и другими специалистами.
Показания
Подготовка к пробе Кумбса
Анализ сдают натощак (8-12 часов голодания). Воду пить можно. У взрослых пациентов проводят забор крови из вены, у новорожденных — из пуповины.
Перед венепункцией необходимо исключить факторы, которые могут повлиять на результат анализа: физические упражнения, эмоциональное возбуждение, алкоголь, лекарства (по согласованию с лечащим врачом), рентгенография, ректальное исследование, физиотерапевтические процедуры. За 30 минут до сдачи крови не рекомендуется курить.
Как оценить анализ?
Антиглобулиновый тест в Одинцово и Звенигороде
Сдать пробу Кумбса в клиниках «ВЕРАМЕД» можно ежедневно без предварительной записи. Опытные медсестры произведут взятие крови быстро и аккуратно, с соблюдением всех санитарных норм. Срок выполнения исследования – 5 рабочих дней.
Непрямая проба кумбса что
Скрининговое лабораторное исследование, позволяющее выявить фиксированные на эритроцитах аутоантитела разных классов, которые играют основную роль в разрушении клеток при гемолитических анемиях.
Прямой антиглобулиновый тест, ПАГТ, прямой тест Кумбса, прямая реакция Кумбса.
Direct antiglobulin test (DAT) with polyspecific antihuman globulin (AHG), Direct Coombs Test, Direct Anti-human Globulin Test.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Аутоиммунные гемолитические анемии характеризуются выработкой антител к эритроцитарным антигенам с последующим разрушением эритроцитов вследствие фагоцитоза или активации системы комплемента.
Таким образом, в качестве лабораторных маркеров аутоиммунного гемолиза целесообразно использовать выявление фиксированных на эритроцитах антител классов IgM и IgG, а также С3 компонента комплемента. В зависимости от эффекта, который аутоантитела оказывают на эритроциты в пробирке, выделяют гемолизины (разрушают клетки) и агглютинины (вызывают склеивание эритроцитов между собой). На способности аутоантител in vitro, то есть в пробирке, вызывать агглютинацию эритроцитов и построено большинство лабораторных методик их выявления.
Современным методом постановки прямого антиглобулинового теста является реакция агглютинации в геле. Используемый в реакции полиспецифический антиглобулиновый реагент содержит антитела к иммуноглобулинy G и к С3 компоненту системы комплемента человека, а также может реагировать с IgA и IgM молекулами. В микропробирки с гелем, содержащим антиглобулиновый реагент, добавляют суспензию исследуемых эритроцитов и центрифугируют. При наличии на поверхности эритроцитов аутоантител они связываются с реагентом, что приводит к агглютинации эритроцитов между собой. В процессе центрифугирования происходит разделение агглютинированных и неагглютинированных эритроцитов. Неагглютинированные эритроциты имеют размер, сравнимый с размером частиц геля, и свободно проходят сквозь них под действием центробежной силы, формируя на дне микропробирки компактный осадок красного цвета, а агглютинированные эритроциты ввиду больших размеров задерживаются на поверхности геля или в его толще.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Антиэритроцитарные антитела к IgG и C3d-компоненту комплемента не обнаружены.
Норма – клетки образуют компактный осадок на дне микропробирки.
Агглютинированные клетки образуют красный слой на поверхности или в толще геля.
Клинический (общий) анализ крови
Билирубин (общий, прямой, непрямой)
Кто назначает исследование?
Гематолог, трансфузиолог, терапевт, врач общей практики, ревматолог, педиатр.
Williams Hematology. 9th edition. By: Kenneth Kaushansky, Marshall Lichtman, Josef Prchal, Marcel M. Levi, Oliver Press, Linda Burns, Michael Caligiuri. McGraw-Hill Education, 2016. Pages 832-836.
Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 716–719.