Окраска по романовскому гимзе что выявляет
Метод окраски микропрепаратов по Романовскому-Гимзе
Посредством данного метода окраске подлежат ацидофильные образования в разные оттенки красного цвета. Образования базофильного характера окрашиваются в цвет от пурпурного до синего.
Момент окрашивания:
Перед началом окрашивания готовый краситель жидкого вида разводят в дистиллированной воде в соотношении 1-2 капель красителя на 1 мг воды. Мазки окрашиваются во влажной камере при температуре 37 °C в течение 20-25 минут. После завершения окраски мазки промываются проточной водой, сушатся на воздухе, а затем исследуются с помощью масляных импрессий.
Красящую смесь Романовского-Гимзы, в основе которой имеется краска Романовского Райта, растворяют в виде порошка в смеси равноправных объемах глицерина и метилового спирта в соотношении 800 мг красителя к 100 мл растворителя.
Краситель обладает плохой растворимостью, поэтому его следует перетереть с растворителем в количественном соотношении 300мг к 100 мг, затем, добавлять краситель при этом постоянно помешивать массу до получения требуемой концентрации. На приготовление красителя требуется несколько дней. Следует акцентировать внимание на том, что в качестве растворителей нужно применять химически чистый метиловый спирт и глицерин, так как именно примеси являются причиной ухудшения свойств красителя. 100 % этиловый спирт может стать идеальной заменой метиловому спирту. Готовую красящую смесь следует хранить в плотно закрытом сосуде в прохладном сухом месте.
Специальный раствор Гимза. Составляющие красителя:
Метод окрашивания:
Мазки, акцентированные в метиловом спирте, окрашивают на протяжении 40-120 минут раствором, в состав которого входят 1 мл приготовленной краски жидкой формы, 2 мл главного буферного раствора и 47 мл дистиллированной воды. Используют фосфатный буфер, на рН которого оказывает влияние вид мазка:
Ополаскивание проводят в дистиллированной воде, затем высушивают и изучают при иммерсии.
Результаты окрашивания:
Амастиготы Leishmania tropica, находящиеся – в макрофагах. Увеличение 10×100, окрашивание по Гимзе.
Бактерии вследствие окрашивания приобретают фиолетово-красный оттенок, цитоплазма клеток — голубой цвет, ядра — красный. Вследствие окраски простейших их цитоплазма становится голубого цвета, а ядра — красно-фиолетового.
Пыль – это то, с чем мы регулярно сталкиваемся повсюду и является чаще всего источником всевозможных аллергенов.
Для рассмотрения микропрепарата в микроскоп необходимо, чтобы он был хорошо освещен, тогда изображение будет ярким и контрастным.
Комментарии к статье «Метод окраски микропрепаратов по Романовскому-Гимзе»
Владимир Григорьев: Цитата: «Окраска по Пинчуну-Романовского-Гимзе впервые была предложена в 1904 году Густавом Гимзой.»
Для справки: метод двойной окраски препаратов крови (катионный краситель азур B + анионный краситель эозин Y ) впервые предложен в 1889 г. российским врачом Ч. И. Хенцинским. В 1891 г. Д. Л. Романовский опубликовал свою диссертацию «К вопросу о паразитологии и терапии болотной лихорадки», имевшей сенсационный эффект для медицины того времени. Препараты крови Д. Л. Романовский окрашивал по методу своего российского коллеги. Соответственно, с работой Романовского Д.Л., получил мировую известность и метод окрашивания предложенный Ч. И. Хенцинским. В 1904 г. Г. Гимза (Gustav Giemsa) предложил улучшение одного из технологических аспектов раствора Романовского (добавление глицерина увеличивало растворимость и стабильность красителей). Работа Г. Гимзы называлась «Giemsasche Lözung für die Romanowsky färbung» (Раствор Гимзы для окраски по Романовскому), т.е. Гимза красил по Романовскому, в отличии от автора статьи.
Работа с микроскопами предполагает точность и самодисциплину, поэтому такая неаккуратность несколько настораживает. С глубоким уважением, Григорьев В.А.
Урогенитальный мазок на флору, без снимка (окраска по Граму, Романовскому-Гимзе)
1 раб. день
соскоб
Описание
Урогенитальный мазок на флору является первым методом оценки состояния здоровья мочеполовых путей у женщин и мужчин.
Мазок на флору проводят для выявления воспаления и общей характеристики микрофлоры.
Как проводится исследование мазка на флору?
Суть метода сводится к тому, что взятый биоматериал тонким слоем наносят на предметное стекло, высушивают, окрашивают специальными красителями, а затем исследуют с помощью светового микроскопа.
В лаборатории «ОВУМ» исследование урогенитальных мазков мужчин и женщин проводится на микроскопах высокого качества изображения, которые оснащены цифровыми камерами с системой вывода изображения на экран компьютера. Это позволяет проводить видеорегистрацию исследований, сохранять архив изображений. При желании пациента, вместе с результатом анализа может быть предоставлен снимок препарата.
Когда нужно сдать мазок на флору?
Какой материал берут для анализа?
Забор материала для исследования производится у женщин из 3-х отделов (влагалище, цервикальный канал, мочеиспускательный канал).
У мужчин исследуются мазки из мочеиспускательного канала, могут проводиться исследования секрета простаты и эякулята. Исследования разных биоматериалов увеличивают вероятность обнаружения патологического процесса и точно определяют его локализацию. Какой материал взять для анализа, выбирает лечащий врач.
Мазки берутся на 2 стекла – для разных окрасок. Одно окрашивается по Романовскому-Гимзе (для характеристики лейкоцитарной реакции и клеточного состава), другое по Граму (для характеристики микрофлоры).
Трактовку результата исследования проводит лечащий врач (акушер-гинеколог, уролог или дерматовенеролог), принимая во внимание данные осмотра, проявления заболевания и результаты всех дополнительных обследований. Врач определяет необходимость и вид лечения.
Что показывает мазок на флору
1.Наличие или отсутствие воспаления.
Проводится подсчет и оценка количества клеток воспаления — лейкоцитов.
Определяется тип клеток эпителия, описываются внутриклеточные изменения: отклонения в соотношении ядра и цитоплазмы, изменения ядра (дистрофия, внутриядерные включения, многоядерность), изменения цитоплазмы (наличие вакуолей, включений в цитоплазме).
Оценивается наличие маркера бактериального вагиноза — «ключевых клеток» –поверхностных эпителиальных клеток, покрытыми Грам (-) мелкими коккобациллами.
3.Качественный и количественный состав микрофлоры.
Могут обнаруживаться специфические возбудители половых инфекций (гонококк, трихомонады), элементы грибов, неспецифическая палочковая и кокковая флора.
Микрофлора характеризуется по отношению к окраске по Граму (относительно свойств и строения клеточной стенки).
По количеству микрофлоры различают небольшое количество (до 10), умеренное (до 100), большое (до 1000) и массивное (более 1000) количество микробных клеток в поле зрения.
Метод световой микроскопии позволяет определять лишь морфотипы бактерий (например, лактобацилл, мобилункуса, бифидобактерий, бактероидов и тд.), а не видовой состав микрофлоры, который дифференцируется только более чувствительными методами, например методом генодиагностики — полимеразной цепной реакцией (ПЦР) или культуральным исследованием – методом бактериального посева.
Чувствительность микроскопического исследования для диагностики ИППП недостаточна, зачастую возбудители заболеваний могут быть выявлены только при остром процессе, когда в биоматериале содержатся большие количества микроорганизма. В случае хронических инфекций и при небольших концентрациях возбудителя рекомендованы более чувствительные методы исследований, например, ПЦР-анализ, культуральное исследование.
Правила подготовки
Окраска по Романовскому — Гимзе
Окраска по Романовскому — Гимзе
Окраска по Романовскому — Гимзе — цитологический метод окраски простейших, бактерий, клеточных структур и тканей различных видов (в том числе крови) при световой микроскопии. Предложена в 1904 году Густавом Гимзой. Окрашивает ацидофильные образования в различные оттенки красного цвета, базофильные — в цвета от пурпурного до синего.
Содержание
Приготовление красителя
Готовый жидкий краситель перед окрашиванием мазков разводят из расчета 1-2 капли красителя на 1 мл дистиллированной воды. Мазки окрашивают 20 — 25 минут при 37 °C во влажной камере (закрытая чашка Петри с увлажнённым фильтром на дне). После окрашивания мазки промывают в проточной воде, сушат на воздухе и исследуют при масляной иммерсии.
Красящую смесь Романовского-Гимзы, которая имеет в основе краску Романовского Райта, в виде порошка (коммерческий краситель) растворяют в смеси равных объемов метилового спирта и глицерина (800 мг красителя на 100 мл растворителя). Краситель растворяется плохо, поэтому лучше его растереть с растворителем в количестве 300 мг на 100 мл, а затем, помешивая, добавлять краситель до получения нужной концентрации. Приготовление красителя часто занимает несколько дней. Важно в качестве растворителей использовать химически чистый метиловый спирт и глицерин, так как примеси ухудшают свойства красителя. Вместо метилового спирта можно применять 100 % этиловый спирт. Приготовленную красящую смесь хранят в сухом прохладном месте в плотно закрытом сосуде.
Специальный стандартный раствор Гимза
Методика окраски
Результат окраски
Бактерии окрашиваются в фиолетово-красный цвет, цитоплазма клеток — в голубой, ядра — в красный. При окрашивании простейших их цитоплазма приобретает голубой цвет, а ядра — красно-фиолетовый.
См. также
Полезное
Смотреть что такое «Окраска по Романовскому — Гимзе» в других словарях:
Окраска по Романовскому — Гимзе цитологический метод окраски простейших, бактерий, клеточных структур и тканей различных видов (в том числе крови) при световой микроскопии. Предложена в 1904[1] году Густавом Гимзой. В авторской версии название красителя «Giemsasche… … Википедия
Окраска по Романовскому-Гимзе — цитологический метод окраски простейших, бактерий, клеточных структур и тканей различных видов (в том числе крови) для облегчения их световой микроскопии. Краситель состоит из эозина, метиленового синего и азура, растворённых в метаноле или в… … Википедия
Окраска по Гимзе — Окраска по Романовскому Гимзе цитологический метод окраски простейших, бактерий, клеточных структур и тканей различных видов (в том числе крови) для облегчения их световой микроскопии. Краситель состоит из эозина, метиленового синего и азура,… … Википедия
Окраска микроорганизмов — (крашение микробов) комплекс методов и приёмов для исследования внешнего и внутреннего строения микроорганизмов, метод микробиологической техники, позволяющий различать виды микроорганизмов. Метод широко используют в прикладной… … Википедия
Окрашивание по Романовскому — Гимзе цитологический метод окрашивания микроорганизмов, клеточных структур и тканей различных видов (в том числе крови) для изучения методом световой микроскопии. Предложена в 1904[1] году Густавом Гимзой. В авторской версии название… … Википедия
Крашение микробов — Окраска микроорганизмов (крашение микробов) комплекс методов и приемов для исследования внешнего и внутреннего строения микроорганизмов, метод микробиологической техники, позволяющий различать виды микроорганизмов. Метод широко используют в… … Википедия
Окрашивание микробов — Окраска микроорганизмов (крашение микробов) комплекс методов и приемов для исследования внешнего и внутреннего строения микроорганизмов, метод микробиологической техники, позволяющий различать виды микроорганизмов. Метод широко используют в… … Википедия
Лейшманио́зы — (leishmanioses) группа трансмиссивных протозойных болезней, вызываемых жгутиковыми простейшими рода Leishmania, переносчиками которых служат москиты, относящиеся к роду Phlebotomus. Вне зависимости от вида лейшмании в своем жизненном цикле… … Медицинская энциклопедия
Список паразитов человека — Паразиты человека это паразиты, заражению которыми подвержен человек. Общее определение слова «паразит» касается не только многоклеточных и простейших, живущих за счёт своего хозяина и во вред последнему, но также вирусов, бактерий и грибов … Википедия
Бакте́рии — (греч. baktērion палочка) одноклеточные микроорганизмы с примитивной цитоплазмой и ядром без ядрышка и ядерной оболочки. Относятся к прокариотам. Наряду с другими микроорганизмами широко распространены в почве воде, воздухе, заселяют… … Медицинская энциклопедия
Урогенитальный мазок на флору, один снимок (окраска по Граму, Романовскому-Гимзе)
1 раб. день
соскоб
Описание
Урогенитальный мазок на флору является первым методом оценки состояния здоровья мочеполовых путей у женщин и мужчин.
Мазок на флору проводят для выявления воспаления и общей характеристики микрофлоры.
Как проводится исследование мазка на флору?
Суть метода сводится к тому, что взятый биоматериал тонким слоем наносят на предметное стекло, высушивают, окрашивают специальными красителями, а затем исследуют с помощью светового микроскопа.
В лаборатории «ОВУМ» исследование урогенитальных мазков мужчин и женщин проводится на микроскопах высокого качества изображения, которые оснащены цифровыми камерами с системой вывода изображения на экран компьютера. Это позволяет проводить видеорегистрацию исследований, сохранять архив изображений. При желании пациента, вместе с результатом анализа может быть предоставлен снимок препарата.
Когда нужно сдать мазок на флору?
Какой материал берут для анализа?
Забор материала для исследования производится у женщин из 3-х отделов (влагалище, цервикальный канал, мочеиспускательный канал).
У мужчин исследуются мазки из мочеиспускательного канала, могут проводиться исследования секрета простаты и эякулята. Исследования разных биоматериалов увеличивают вероятность обнаружения патологического процесса и точно определяют его локализацию. Какой материал взять для анализа, выбирает лечащий врач.
Мазки берутся на 2 стекла – для разных окрасок. Одно окрашивается по Романовскому-Гимзе (для характеристики лейкоцитарной реакции и клеточного состава), другое по Граму (для характеристики микрофлоры).
Трактовку результата исследования проводит лечащий врач (акушер-гинеколог, уролог или дерматовенеролог), принимая во внимание данные осмотра, проявления заболевания и результаты всех дополнительных обследований. Врач определяет необходимость и вид лечения.
Что показывает мазок на флору?
1.Наличие или отсутствие воспаления.
Проводится подсчет и оценка количества клеток воспаления — лейкоцитов.
Определяется тип клеток эпителия, описываются внутриклеточные изменения: отклонения в соотношении ядра и цитоплазмы, изменения ядра (дистрофия, внутриядерные включения, многоядерность), изменения цитоплазмы (наличие вакуолей, включений в цитоплазме).
Оценивается наличие маркера бактериального вагиноза — «ключевых клеток» –поверхностных эпителиальных клеток, покрытыми Грам (-) мелкими коккобациллами.
3.Качественный и количественный состав микрофлоры.
Могут обнаруживаться специфические возбудители половых инфекций (гонококк, трихомонады), элементы грибов, неспецифическая палочковая и кокковая флора.
Микрофлора характеризуется по отношению к окраске по Граму (относительно свойств и строения клеточной стенки).
По количеству микрофлоры различают небольшое количество (до 10), умеренное (до 100), большое (до 1000) и массивное (более 1000) количество микробных клеток в поле зрения.
Метод световой микроскопии позволяет определять лишь морфотипы бактерий (например, лактобацилл, мобилункуса, бифидобактерий, бактероидов и тд.), а не видовой состав микрофлоры, который дифференцируется только более чувствительными методами, например методом генодиагностики — полимеразной цепной реакцией (ПЦР) или культуральным исследованием – методом бактериального посева.
Чувствительность микроскопического исследования для диагностики ИППП недостаточна, зачастую возбудители заболеваний могут быть выявлены только при остром процессе, когда в биоматериале содержатся большие количества микроорганизма. В случае хронических инфекций и при небольших концентрациях возбудителя рекомендованы более чувствительные методы исследований, например, ПЦР-анализ, культуральное исследование.
Правила подготовки
Окрашивание основы Гимзы, материалы, техника и использование
Гимза пятно это тип окрашивания клинических образцов, основанный на смеси кислотных и основных красителей. Его создание было вдохновлено работой, проделанной Романовским, где Густав Гимса, химик и бактериолог из Германии, усовершенствовал его, добавив глицерин для стабилизации соединений..
Изменения, внесенные в оригинальную технику Романовского, позволили значительно улучшить микроскопические наблюдения, поэтому метод был крещен с именем окраски Гимзы..
Поскольку это простой метод для выполнения, высоко функциональный и экономичный, в настоящее время он широко используется в клинической лаборатории для гематологических мазков, образцов костного мозга и срезов тканей..
Техника окрашивания по Гимзе очень полезна для цитологических исследований, так как позволяет наблюдать специфические структуры клеток. Этот метод окрашивает цитоплазмы, ядра, ядрышки, вакуоли и гранулы клеток, что позволяет различать даже мелкие следы хроматина.
Кроме того, могут быть обнаружены значительные изменения в размере, форме или окраске ядра, где можно визуализировать потерю связи ядро-цитоплазма..
В цитогенетике это вполне используется, так как можно изучать митоз клеток.
Основание окраски Гимзы
Красители типа Романовского основаны на использовании контраста между кислотными и основными красителями для достижения окрашивания основных и кислотных структур, соответственно. Как можно видеть, существует сродство кислотных красителей к окрашиванию основных структур и наоборот..
Кислотными структурами клеток являются, среди прочего, нуклеиновые кислоты, гранулы сегментированных базофилов, поэтому они будут окрашены метиленовым синим..
В этом же смысле основными структурами клеток являются, среди прочего, гемоглобин и некоторые гранулы, такие как те, которые содержатся в сегментированных эозинофилах; они будут окрашены эозином.
С другой стороны, из-за того, что метиленовый синий и лазурь характеризуются метахроматическими красителями, они могут придавать переменный тон различным структурам в зависимости от нагрузки на полианионы, которыми они обладают..
Таким образом, стратегическое сочетание основных и кислотных красителей способно создавать широкий спектр цветов в соответствии с биохимическими характеристиками каждой структуры, проходя через бледно-голубой, темно-синий, сиреневый и фиолетовый тона в случае кислотных структур..
В то время как окраска, обеспечиваемая эозином, является более стабильной, образуются цвета между красновато-оранжевым и лососевым.
материалы
Материалы для приготовления материнского раствора
Приготовление исходного раствора требует взвешивания 600 мг порошкообразного красителя Гимза, измерения 500 см 3 безметонового метилового спирта и 50 см 3 нейтрального глицерина.
Режим приготовления материнского раствора
Поместите тяжелый порошок Гимзы в ступку. Если есть комки, их следует опрыскивать. Затем добавьте значительное количество отмеренного глицерина и очень хорошо перемешайте. Полученную смесь разливают в очень чистую янтарную бутылку.
Остальная часть глицерина помещается в ступку. Смешайте еще раз, чтобы очистить оставшийся краситель, прилипший к стенкам раствора, и вылейте в ту же бутылку..
Бутылку накрывают и выдерживают в течение 2 часов на водяной бане при 55ºC. Находясь в ванне на водяной бане, слегка перемешивайте смесь каждые полчаса или около того.
Затем смеси дают остыть для размещения спирта. Ранее часть отмеренного спирта помещают в ступку, чтобы закончить промывание остатка красителя, а затем добавляют к смеси вместе с остальным спиртом..
Этот препарат должен быть выдержан в течение не менее 2 недель. Часть, которая используется материнского раствора должна быть отфильтрована.
Чтобы избежать загрязнения препарата, рекомендуется передавать порцию, которая будет постоянно использоваться, в небольшую янтарную бутылочку с капельницей. Подзаряжайте каждый раз, когда заканчивается реагент.
Материалы для приготовления Буферного раствора
С другой стороны, буферный раствор при рН 7,2 готовят следующим образом:
Взвешивают 6,77 г фосфата натрия (безводного) (NaHPO4), 2,59 г дигидрофосфата калия (KH)2ПО4) и дистиллированная вода до 1000 куб..
Окончательная подготовка красителя
Для приготовления конечного окрашивающего раствора измеряют 2 см 3 отфильтрованного маточного раствора и смешивают с 6 см 3 буферного раствора. Смесь перемешивают.
Важным фактом, который необходимо учитывать, является то, что методы приготовления красителя могут меняться в зависимости от коммерческого дома.
Дополнительные материалы, необходимые для выполнения окраски
Помимо описанных материалов, он должен быть снабжен цветными мостиками, водяными экранами или буфером для стирки, листами для предметов или крышек, секундомером для контроля времени окрашивания и промокательной бумагой или некоторым материалом, который можно использовать для сушки ( марля или хлопок).
техника
Процесс окрашивания
1) Перед окрашиванием необходимо нанести образец на чистое предметное стекло..
Образцы могут быть кровью, костным мозгом, срезами гистологических тканей или шейно-вагинальными образцами. Рекомендуется, чтобы наружная сторона была тонкой и имела 1 или 2 часа высыхания перед окрашиванием.
2) Все листы, которые вы должны раскрасить, помещены на цветной мост. Всегда работайте в одном и том же порядке и хорошо идентифицируйте каждый лист.
3) Поместите несколько капель 100% метилового спирта (метанола) на мазок и оставьте на 3-5 минут, чтобы зафиксировать и обезвоживать образец..
4) Откажитесь от метанола, присутствующего в листе, и дайте высохнуть на воздухе.
5) После высыхания поместите окончательный окрашивающий раствор капельницей, пока весь лист не будет покрыт. Оставить на 15 минут. Некоторые авторы рекомендуют до 25 мин. Зависит от коммерческого дома.
6) Слейте краситель и промойте мазок дистиллированной водой или 7,2 буферным раствором..
7) На промокательной бумаге дайте листам высохнуть на открытом воздухе, расположив их вертикально с помощью подставки..
8) Протрите заднюю часть слайда марлей или ватным тампоном, смоченным в спирте, чтобы удалить оставшийся краситель..
коммунальные услуги
Техника окрашивания Гимзы используется в нескольких областях, в том числе: гематология, микология, бактериология, паразитология, цитология и цитогенетика..
гематология
Это наиболее частая полезность, которая дается для этого окрашивания. С его помощью мы можем идентифицировать каждую из клеток, присутствующих в образцах костного мозга или периферической крови. А также оценка количества каждой серии, возможность обнаружить лейкоцитоз или лейкопению, тромбоцитопению и т. Д..
Поскольку он чувствителен для выявления незрелых клеток, он имеет отношение к диагностике острых или хронических лейкозов. Также возможно диагностировать анемию, такую как серповидно-клеточная анемия, серповидно-клеточная анемия и др..
микология
В этой области обычно используют его для поиска Histoplasma capsulatum (внутриклеточный диморфный гриб) в образцах тканей.
бактериология
В гематологических мазках, окрашенных по Гимзе, можно обнаружить Borrelias sp у пациентов, которые имеют заболевание под названием лихорадка рецидивирующая. Спирохеты распространены среди эритроцитов в образцах, взятых на фебрильном пике..
Также можно визуализировать внутриклеточные бактерии как Rickettsias sp и Chlamydia trachomatis в инфицированных клетках.
паразитология
В области паразитологии окрашивание по Гимзе позволило диагностировать такие паразитарные заболевания, как малярия, болезнь Шагаса и лейшманиоз..
В первых двух паразитах Plasmodium sp и Трипаносома Крузи соответственно они могут быть визуализированы в периферической крови инфицированных пациентов, они могут быть обнаружены на разных стадиях в зависимости от фазы, в которой заболевание.
Для улучшения поиска паразитов крови рекомендуется использовать краситель Гимза, смешанный с красителем Май-Грюнвальд.
Кроме того, кожный лейшманиоз можно диагностировать при оценке образцов биоптатов кожи, окрашенных по Гимзе, где обнаружен паразит..
цитология
Окрашивание по Гимзе также используется для цитологического исследования эндоцервикальных образцов, хотя это не самый часто используемый метод для этой цели..
Но в случаях нехватки ресурсов можно использовать, имея функциональность, аналогичную той, которая предлагается по методике Папаниколау, и с меньшими затратами. Тем не менее, это требует экспертизы со стороны эксперта.
цитогенетики
Важной особенностью окрашивания Гимзы является его способность сильно связываться с областями, богатыми аденинами ДНК и тиминами. Это позволяет визуализировать ДНК во время митоза клеток, в разных состояниях конденсации.
Эти исследования необходимы для выявления хроматических аберраций, таких как дупликации, делеции или транслокации различных областей хромосом..
Исследование, демонстрирующее эффективность окрашивания по Гимзе
Cannova et al. (2016) сравнили 3 метода окраски для диагностики кожного лейшманиоза.
Для этого они использовали образцы, полученные от экспериментального животного (Mesocrisetus auratus) экспериментально привит с лейшмании.
Авторы продемонстрировали, что окрашивание по Гимзе было лучше, чем по окрашиванию Pap-mart® и Gaffney. Поэтому они считали, что пятно Гимзы идеально подходит для диагностики кожного лейшманиоза..
Отличные результаты, полученные авторами, объясняются тем, что комбинация красителей, составляющих смесь Гимзы, создает необходимые условия для создания благоприятного контраста, позволяющего четко различать структуры амастигота как внутри, так и вне клетки..
Другие методы (Pap-mart® и Gaffney) также делали это, но более слабым способом и, следовательно, более трудным для визуализации. Вот почему пятно Гимзы рекомендуется для паразитологической диагностики лейшманиоза.
Аналогичным образом, исследование, проведенное Ramírez и соавторами (1994), оценило валидность пятен Гимзы и Лендрума в мазках из конъюнктивы для идентификации Chlamydia trachomatis.
Авторы определили, что окрашивание Гимзы и Ледрума имеет одинаковую специфичность, но Гимза была более чувствительной.
Это объясняет, почему в настоящее время окрашивание по Гимзе является наиболее часто используемым для диагностики хламидийных инфекций, особенно если ресурсов мало.
Рекомендации по хорошему окрашиванию
Сушка листов не должна быть ускорена. Пруденциальное время следует ждать, чтобы высушить его на открытом воздухе. Примерно 2 часа.
Цвет сразу после 2 часов для достижения наилучших результатов.
Для лучшего закрепления и окрашивания мазков образец должен быть распределен на листе таким образом, чтобы остался тонкий и равномерный слой..
Предпочтительным образцом крови является капилляр, так как мазок сделан непосредственно из капли крови, и поэтому в образце нет добавки, которая способствует поддержанию клеточных структур..
Однако, если используется венозная кровь, ЭДТА следует использовать в качестве антикоагулянта, а не гепарина, поскольку последний обычно деформирует клетки.
Распространенные ошибки в раскраске Гимзы
В практике этой раскраски могут быть допущены ошибки. Об этом свидетельствуют внезапные изменения оттенков конструкций.
Чрезвычайно синяя окраска
Это может быть связано с:
В этих условиях цвета следующих структур искажаются, так что эритроциты вместо умирающего розового лосося будут выглядеть зелеными, гранулы эозинофилов, которые должны быть окрашены в красный кирпич, станут синими или серыми и так далее, отклонение в обычных тональностях.
Чрезмерно розовая окраска
Это может быть связано с:
В этом конкретном случае структуры, которые обычно окрашены в синий цвет, будут почти не видны, в то время как структуры, которые окрашены в розовый цвет, будут иметь очень преувеличенные тональности.
Наличие осадков в мазке
Причины могут быть:
Наличие морфологических артефактов
В мазках могут появляться морфологические артефакты, что затрудняет визуализацию и интерпретацию имеющихся структур. Это связано с:
Режим хранения
После приготовления краситель должен храниться при комнатной температуре (15-25 ° C), чтобы предотвратить выпадение красителя. Хранить в закрытой янтарной таре.