Что такое ИФА?
Иммуноферментный анализ в клинике

Какие инфекции можно выявить методом ИФА
В основном ИФА применяется для диагностики сифилиса (в комплексе с другими реакциями), ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов. Имеет ограниченное значение для диагностики хламидийной инфекции, цитомегаловирусной инфекции и других герпетических инфекций. Метод ИФА используется также для определения антител при различных инфекционных заболеваниях, уровня гормонов, аутоантител и различных маркеров онкологических заболеваний.
Исследование наличия и уровня антител различных классов в некоторых случаях помогает определить стадию инфекционного процесса.
Преимущества ИФА относительно других методов обнаружения антигенов и антител:
| — высокая чувствительность, которая, составляющая 90%; | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| — стабильность при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (год и более); | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| — быстрота и удобство проведения диагностической реакции; | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| — возможность использовать минимальные объемы исследуемого материала; | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| — возможность автоматизации всех этапов проведения реакции; | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| — небольшая стоимость диагностических наборов; | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| — возможность ранней диагностики инфекции; | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| — унифицированность и пригодность для массовых обследований; | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Название исследования | Клинический материал | Результат | Срок испол. | Цена | ||
| СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | ||||||
| Гепатит А | ||||||
| anti-HAV IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 320,00р. | ||
| anti-HAV IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 320,00р. | ||
| Гепатит В | ||||||
| HBsAg | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 200,00р. | ||
| anti-HBs | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 340,00р. | ||
| anti-HBs | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 520,00р. | ||
| anti-HBc IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 560,00р. | ||
| HBeAg | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 440,00р. | ||
| anti-HBe | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 390,00р. | ||
| HBsAg (количественный метод) | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 1 370,00р. | ||
| anti-HBc (суммарное) | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 340,00р. | ||
| Гепатит С | ||||||
| anti-HCV IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 360,00р. | ||
| anti-HCV (суммарное) | кровь (сыворотка) | кач. | 1 р.д. | 340,00р. | ||
| Гепатит D | ||||||
| anti-HDV | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 320,00р. | ||
| anti-HDV IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 320,00р. | ||
| Гепатит Е | ||||||
| anti-HEV IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 420,00р. | ||
| anti-HEV IgМ | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 530,00р. | ||
| Сифилис | ||||||
| Syphilis RPR (RW) | кровь (сыворотка) | кач. | 1 р.д. | 220,00р. | ||
| Syphilis TPHA (РПГА) | кровь (сыворотка) | кач. | 1 р.д. | 290,00р. | ||
| Syphilis TPHA (РПГА) | кровь (сыворотка) | п.кол. | 1 р.д. | 340,00р. | ||
| anti-Treponema pallidum (суммарные) | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 570,00р. | ||
| ВИЧ | ||||||
| anti-HIV 1/2 | кровь (сыворотка) | кач. | 1 р.д. | 420,00р. | ||
| Вирус простого герпеса | ||||||
| anti-HSV 1 типа IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 410,00р. | ||
| anti-HSV 2 типа IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 410,00р. | ||
| anti-HSV 1,2 типа IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 470,00р. | ||
| anti-HSV 1,2 типа IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 470,00р. | ||
| Цитомегаловирус | ||||||
| anti-CMV IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 500,00р. | ||
| anti-CMV IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 410,00р. | ||
| CMV IgG (авидность) | кровь (сыворотка) | кач. | 3 р.д. | 790,00р. | ||
| Вирус краснухи | ||||||
| anti-Rubella IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 440,00р. | ||
| anti-Rubella IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 410,00р. | ||
| Rubella IgG (авидность) | кровь (сыворотка) | кол. | 3 р.д. | 800,00р. | ||
| Вирус кори | ||||||
| anti-Measles virus IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 520,00р. | ||
| anti-Measles virus IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 520,00р. | ||
| Вирус паротита | ||||||
| anti-Mumps IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 550,00р. | ||
| anti-Mumps IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 550,00р. | ||
| Вирус Эпштейна- Барр | ||||||
| anti-EBV-VCA IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 530,00р. | ||
| anti-EBV-VCA IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 530,00р. | ||
| anti-EBV-EBNA IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 530,00р. | ||
| anti-EBV-EA IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 530,00р. | ||
| Хеликобактер | ||||||
| anti-Helicobacter pylori IgA | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 530,00р. | ||
| anti-Helicobacter pylori IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 530,00р. | ||
| Хламидии | ||||||
| anti-Chlamydia trachomatis IgG | кровь (сыворотка) | п.кол. | 2 р.д. | 440,00р. | ||
| anti-Chlamydia trachomatis IgA | кровь (сыворотка) | п.кол. | 2 р.д. | 440,00р. | ||
| anti-Chlamydia pneumonia IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 440,00р. | ||
| anti-Chlamydia pneumonia IgA | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 440,00р. | ||
| anti-Chlamydia trachomatis IgМ | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 440,00р. | ||
| anti-Chlamydia pneumonia IgМ | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 440,00р. | ||
| Микоплазмы | ||||||
| anti-Mycoplasma hominis IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| anti-Mycoplasma hominis IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| anti-Mycoplasma hominis IgА | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| anti-Mycoplasma pneumonia IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| anti-Mycoplasma pneumonia IgA | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| anti-Mycoplasma pneumonia IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| Токсоплазмы | ||||||
| anti-Toxo gondii IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 480,00р. | ||
| anti-Toxo gondii IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 480,00р. | ||
| Toxo gondii IgG (авидность) | кровь (сыворотка) | кач. | 3 р.д. | 810,00р. | ||
| Лямблии | ||||||
| anti-Giardia Lamblia(cуммарные) | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 320,00р. | ||
| anti-Giardia Lamblia IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 320,00р. | ||
| Гельминты | ||||||
| антитела к описторхам | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 280,00р. | ||
| антитела к эхинококку | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 280,00р. | ||
| антитела к токсокарам | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 280,00р. | ||
| антитела к трихинеллам | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 280,00р. | ||
| антитела к аскаридам IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2-4 р.д. | 610,00р. | ||
| Уреаплазмы | ||||||
| anti-Ureaplasma urealyticum IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| anti-Ureaplasma urealyticum IgА | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| anti-Ureaplasma urealyticum IgМ | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 310,00р. | ||
| Вирус герпеса VI типа | ||||||
| anti-HHV IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 4 р.д. | 610,00р. | ||
| Парвовирус В19 | ||||||
| anti-В19 IgG | кровь (сыворотка) | п.кол. | 2-4 р.д. | 820,00р. | ||
| anti-В19 IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2-4 р.д. | 890,00р. | ||
| Вирус ветряной оспы (VZV) | ||||||
| anti-VZV IgG | кровь (сыворотка) | п.кол. | 2 р.д. | 610,00р. | ||
| anti-VZV IgM | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 610,00р. | ||
| Диагностика кандидоза и аспергиллеза | ||||||
| Антитела к Candida IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 520,00р. | ||
| Антитела к Aspergilius IgG | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 520,00р. | ||
| Вирус клещевого энцефалита | ||||||
| Антитела к вирусу клещевого энцефалита IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 1-4 р.д. | 630,00р. | ||
| Антитела к вирусу клещевого энцефалита IgМ | кровь (сыворотка) | п.кол. | 1-4 р.д. | 700,00р. | ||
| Вирус Денге | ||||||
| Антитела к вирусу Денге, IgG | кровь (сыворотка) | кол | 4 р.д. | 2210,00р. | ||
| Антитела к вирусу Денге, IgМ | кровь (сыворотка) | п.кол. | 4 р.д. | 2210,00р. | ||
| Коклюш | ||||||
| Антитела к Bordetella pertussis IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 2 р.д. | 610,00р. | ||
| Антитела к Bordetella pertussis IgМ | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 610,00р. | ||
| Антитела к Bordetella pertussis IgА | кровь (сыворотка) | кач. | 2 р.д. | 610,00р. | ||
| Вирус Западного Нила | ||||||
| anti-WNV IgM | кровь (сыворотка) | п.кол. | 4 р.д. | 2210,00р. | ||
| anti-WNV IgG | кровь (сыворотка) | п.кол. | 4 р.д. | 2210,00р. | ||
| Боррелии | ||||||
| anti-Borrelia, IgM | кровь (сыворотка) | п.кол. | 1-4 р.д. | 770,00р. | ||
| anti-Borrelia, IgG | кровь (сыворотка) | кол. | 1-4 р.д. | 770,00р. | ||
| Легионеллы | ||||||
| Ag Legionella pneumophila серогруппы 1 | моча | кач. | 2-5 р.д | 610,00р. | ||
* Исследование в режиме CITO:
Иммуноферментный анализ
Иммуноферментный анализ (ИФА) — один из видов иммунохимического анализа. Он основан на высокоспецифической иммунологической реакции антигена (АГ) с соответствующим антителом (АТ) с образованием иммунного комплекса. При этом один из компонентов конъюгирован с ферментом. В результате реакции фермента с хромогенным субстратом образуется окрашенный продукт, количество которого можно определить спектрофотометрически.
Любой вариант ИФА содержит 3 обязательные стадии:
В реакции участвуют:
Твердая фаза
В качестве твердой фазы для проведения ИФА можно применять различные материалы: полистирол, поливинилхлорид, полипропилен и другие. Твердой фазой могут служить стенки пробирки, 96-луночные и др. планшеты, шарики, бусины, а также нитроцеллюлозные и другие мембраны, активно сорбирующие белки.
Антигены и антитела
АГ и AT, используемые в ИФА, должны быть высокоочищенными и высокоактивными. АГ должны обладать высокой антигенностью, оптимальной плотностью расположения и количеством антигенных детерминант.
Чувствительность ИФА зависит от концентрации, активности и специфичности используемых антител. Используемые АТ могут быть поли- или моноклональными, различного класса (IgG или IgM) и подкласса (IgG1, IgG2).
Чувствительность и специфичность метода повышается при использовании моноклональных антител. В этом случае появляется возможность обнаруживать низкие концентрации АГ (AT) в образцах.
Ферментные маркеры: наибольшее применение нашли пероксидаза хрена (ПХ), щелочная фосфатаза (ЩФ) и β-D-галактозидаза.
Субстраты
Выбор субстрата, в первую очередь, определяется используемым в качестве метки ферментом, так как реакция «фермент-субстрат» высокоспецифична.
Классификация ИФА
В основу классификации методов ИФА положено несколько подходов:
1 — по типу реагентов, присутствующих на первой стадии ИФА:
2 — по принципу определения исследуемого вещества:
3 — по типу результатов:
Конкурентный ИФА
Конкурентный ИФА для определения антител: искомые антитела и меченые ферментом антитела конкурируют друг с другом за антигены, сорбированные на твердой фазе.
Неконкурентный «сэндвич» – вариант ИФА
Основным достоинством метода является высокая чувствительность, превосходящая возможности других схем ИФА.
Качественный анализ часто используют при скрининговых исследованиях и диагностике инфекционных заболеваний. Результат исследования определяется при сравнении его оптической плотности с расчетной величиной критической оптической плотности (ОПкрит., «Cut-off»).
Формулу для расчета «Cut-off» указывают в инструкции к тест-системе. В расчете «Cut-off» могут участвовать как усредненные значения оптических плотностей положительных и отрицательных контролей, так и оптическая плотность специального контрольного образца — контроля уровня среза.
Если оптическая плотность образца выше, чем Cut-off, образец считается положительным на специфические антитела.
Для полуколичественного варианта проведения методики рассчитывают отношение между средней оптической плотностью образца и оптической плотностью Cut-off.
Образцы рассматриваются как:
Сомнительные результаты анализа нельзя однозначно интерпретировать и для уточнения результата необходимо повторить обследование через 1–2 недели.
Методом ИФА определяют:






















